Valil-Prolil-Prolina

Valil-Prolil-Prolina (VPP): Un Artículo de Referencia Integral

1. Identidad y Caracterización Química

1.1 Nomenclatura y Naturaleza Química

La Valil-Prolil-Prolina (abreviada VPP; nombre sistemático L-valil-L-prolil-L-prolina) es un tripéptido bioactivo de origen natural compuesto por tres residuos de aminoácidos en la secuencia valina–prolina–prolina. Los dos tripéptidos L-valil-L-prolil-L-prolina (VPP) y L-isoleucil-L-prolil-L-prolina (IPP) han sido identificados como poseedores de una actividad inhibitoria significativa de la enzima convertidora de angiotensina, por lo que se cree que son la fuente de los efectos normotensivos observados con la leche fermentada. La VPP pertenece a la clase de péptidos bioactivos de origen alimentario denominados colectivamente lactotripéptidos (LTP). Los péptidos pequeños derivados de la leche han mostrado potencial para reducir la vasoconstricción mediada por la angiotensina II, ya que, mecánicamente, imitan a los inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (IECA). Los péptidos mejor caracterizados son la isoleucina–prolina–prolina (IPP) y la valina–prolina–prolina (VPP), denominados lactotripéptidos (LTP).

Las propiedades físico-químicas, los pesos moleculares, las estructuras químicas, el consumo habitual en la dieta, la información de fabricación, la aprobación regulatoria en Japón y el consumo japonés de alimentos con niveles aumentados de VPP más IPP son características establecidas de este péptido que han sido formalmente caracterizadas en documentación toxicológica y regulatoria publicada.

1.2 Fuentes Naturales

Los lactotripéptidos son dos péptidos lácteos de origen natural: la isoleucina-prolina-prolina (IPP) y la valina-prolina-prolina (VPP). Estos lactotripéptidos derivan de la caseína, una proteína láctea que también se encuentra en los productos lácteos. Aunque la mayoría de los productos lácteos normales contienen lactotripéptidos, estos permanecen inactivos dentro de las proteínas lácteas originales. Los péptidos lácteos pueden liberarse eficazmente mediante predigestión enzimática, un proceso mediante el cual la proteína de la leche se descompone enzimáticamente en fragmentos más pequeños.

La VPP y la IPP se liberan de las proteínas de la leche bovina durante la digestión oro-gastrointestinal (OGI) in vitro, alcanzando concentraciones finales de 354.3 ± 29.8 y 973.8 ± 155.7 µg/L, respectivamente. El análisis in silico de los sitios de escisión y la espectrometría de masas revelaron que los tetrapéptidos VPPF, IPPL e IPPK son precursores de la VPP y la IPP.

La VPP y la IPP son péptidos inhibidores de la ECA bien conocidos, obtenidos originalmente por Nakamura et al. (1995) utilizando Lactobacillus helveticus y Saccharomyces cerevisiae como fermentadores para producir la leche agria Calpis, y aislados mediante un método de HPLC de cuatro pasos, con valores de IC₅₀ de 9 μM y 5 μM para sus actividades inhibitorias de la ECA in vitro, respectivamente. Desde entonces, investigadores han aislado estos dos péptidos inhibidores de la ECA a partir de caseína de búfala, yak, cabra, así como de masa madre elaborada con centeno, trigo y malta.

1.3 Métodos de Preparación y Formas Comerciales

Los tripéptidos isoleucil-prolil-prolina (IPP) y valil-prolil-prolina (VPP) pueden obtenerse mediante fermentación de la leche por ciertas bacterias del ácido láctico, por hidrólisis enzimática de la caseína, o por síntesis química. Los LTP se obtienen a partir de leche fermentada o tratada enzimáticamente (FLTP o ELTP).

Comercialmente, la VPP está disponible de manera más destacada como ingrediente patentado. Un producto comercial bien caracterizado se fabrica mediante un proceso patentado de fermentación y tratamiento enzimático que libera dos tripéptidos clave, la Valil-Prolil-Prolina (VPP) y la Isoleucil-Prolil-Prolina (IPP), compuestos por las cadenas de aminoácidos valina, prolina e isoleucina, a partir de la caseína. Estos productos proporcionan VPP e IPP en concentraciones que no serían prácticas de alcanzar mediante el consumo de productos lácteos.

La leche fermentada con Lactobacillus helveticus contiene péptidos pequeños como la isoleucil-prolil-prolina (IPP) y la valil-prolil-prolina (VPP), que inhiben la enzima convertidora de angiotensina (ECA). Lactobacillus helveticus es una de las especies de Lactobacillus más eficientes en términos proteolíticos en comparación con otras bacterias del ácido láctico.

Dos productos lácteos fermentados comerciales notables que incorporan VPP e IPP son el producto japonés Calpis y el producto finlandés Evolus. Evolus, un producto lácteo fermentado de Valio Ltd. (Helsinki, Finlandia), y Calpis, un producto de leche agria de Calpis Co. Ltd. (Tokio, Japón), contienen ambos los péptidos bioactivos IPP y VPP, conocidos por sus beneficios antihipertensivos. Más allá de los líquidos fermentados, la VPP y la IPP también se han incorporado en formas líquidas o en comprimidos, administrados durante períodos que oscilaron entre cuatro y 21 semanas en investigaciones clínicas, generalmente con un período de preinclusión de una a cuatro semanas.

2. Uso Tradicional e Histórico

El consumo de leche fermentada para mantener una buena salud, incluida la conservación de una presión arterial normal, es una tradición antigua en varias regiones del mundo (por ejemplo, el este de Asia, Francia). La VPP en sí no fue identificada como un compuesto bioactivo aislado dentro de la práctica tradicional; más bien, se consumía como un componente endógeno de los alimentos lácteos fermentados en estas tradiciones culturales.

El descubrimiento científico formal y el aislamiento de la VPP como componente antihipertensivo específico de dicha leche fermentada datan de mediados de la década de 1990. La investigación del Grupo Asahi sobre bacterias del ácido láctico y leche fermentada se remonta a Calpis, una empresa que produjo y lanzó al mercado la primera bebida de bacterias del ácido láctico de Japón en 1919. Pruebas realizadas en ratones en la década de 1970, como parte de un proyecto de investigación conjunto entre Calpis y Riken, encontraron que la longevidad se veía favorecida por una fórmula patentada de leche fermentada elaborada con bacterias del ácido láctico y levadura. Esta investigación animal fundacional condujo finalmente a la identificación de la VPP y la IPP como los componentes bioactivos específicos responsables de los efectos cardiovasculares observados en las preparaciones tradicionales de leche fermentada.

Estudios recientes han sugerido que la leche fermentada tiene un efecto normotensivo en ratas e individuos hipertensos, pero ningún efecto sobre la presión arterial en ratas e individuos normotensos. Este patrón es coherente con la observación de que las poblaciones tradicionales consumían leche fermentada de manera generalizada como parte de las prácticas dietéticas generales de salud, en lugar de como una intervención farmacológica dirigida.

3. Componentes Clave, Compuestos Activos y Mecanismos de Acción

3.1 Inhibición de la Enzima Convertidora de Angiotensina (ECA)

El mecanismo principal y mejor establecido de la VPP es la inhibición de la enzima convertidora de angiotensina (ECA). La enzima convertidora de angiotensina I somática humana (sACE) está compuesta por un dominio catalítico N (nACE) y un dominio C (cACE) de tamaño similar pero con especificidades de sustrato distintas. Está involucrada en la regulación de la presión arterial al convertir la angiotensina I en el vasoconstrictor angiotensina II, y ha sido un foco importante en el desarrollo de terapias para la hipertensión.

Investigaciones estructurales mediante cristalografía de rayos X y análisis cinético han descrito la base estructural del papel de Val-Pro-Pro e Ile-Pro-Pro en la inhibición dominio-específica de la ECA. Los lactotripéptidos presentan preferencia por la nACE debido a interacciones polares alteradas distales al ion zinc catalítico. Dilucidar el mecanismo de unión y la selectividad de dominio de estos péptidos también proporciona conocimientos importantes sobre las funciones de la ECA.

Se ha propuesto que la reducción de la presión arterial (PA) mediante lactotripéptidos se debe a la inhibición del sistema renina-angiotensina, el cual desempeña un papel importante en la regulación de la presión arterial. La renina convierte el angiotensinógeno en la angiotensina I, biológicamente inactiva, que a su vez se somete a escisión proteolítica por parte de la ECA para formar el vasoconstrictor angiotensina II. La inhibición de la ECA conduce a un aumento de la relación angiotensina I/angiotensina II y a un aumento compensatorio posterior de la actividad de la renina.

3.2 Producción de Óxido Nítrico y Función Endotelial

Más allá de la inhibición de la ECA, se ha demostrado que la VPP ejerce efectos directos sobre las células endoteliales mediante la estimulación de la síntesis de óxido nítrico (NO). Con este fin, los investigadores examinaron el efecto de la VPP y la IPP sobre la inducción de la producción de óxido nítrico (NO) utilizando células endoteliales vasculares en cultivo y vasos arteriales aislados. Cuando tanto la VPP como la IPP se añadieron al medio de células endoteliales en cultivo a concentraciones finales superiores a 100 nmol/l, la concentración de NO_x (NO₂ y NO₃) en el medio fue significativamente mayor que la del control.

Además, tanto la VPP como la IPP indujeron una relajación dependiente del endotelio en anillos aórticos aislados, y estos efectos fueron inhibidos por inhibidores de la NO sintasa, inhibidores de los canales de potasio y antagonistas del receptor B2 de bradicinina.

El tratamiento con VPP e IPP redujo el nivel de especies reactivas de oxígeno y la expresión de moléculas de adhesión inducida por vesículas extracelulares, y restauró la capacidad de formación de tubos mediante la regulación al alza de la expresión de la óxido nítrico sintasa endotelial.

3.3 Efectos sobre la Expresión Génica

Estudios de microarreglos de ADN en modelos animales espontáneamente hipertensos han aclarado aún más los mecanismos de la VPP a nivel genómico. Se detectaron diferencias significativas y marcadas en el gen de la óxido nítrico sintasa endotelial (eNOS) (1.89 veces, P<0.05) y en el gen de la conexina 40 (unión gap 40) (2.81 veces, P<0.05). La administración de VPP e IPP produjo un leve aumento en la expresión del gen de la ciclooxigenasa (COX-1) y una disminución en la expresión tanto del gen de la subunidad del factor nuclear kappa B (NF-κB), relacionado con la función vascular, como del gen del receptor activado por proliferadores de peroxisomas gamma (PPARγ). En conjunto, estos resultados sugieren que la VPP y la IPP funcionan como inhibidores de la ECA en la aorta, donde podrían desempeñar un papel preventivo en la función cardiovascular.

Investigaciones han reportado que los LTP promueven la producción de NO a través de la activación de la óxido nítrico sintasa endotelial (eNOS) y ejercen efectos vasodilatadores en humanos. Se ha demostrado que los LTP inhiben la contracción vascular mediante la inhibición de la ECA, con efectos antihipertensivos confirmados en ensayos clínicos. También se han observado mejoras en la función endotelial derivadas de la ingesta de LTP, a través de una mayor dilatación mediada por flujo (FMD) y de la velocidad de onda de pulso, en estudios clínicos.

4. Evidencia Científica por Área de Uso

4.1 Reducción de la Presión Arterial

Evidencia de Metaanálisis

Los efectos de los péptidos derivados de proteínas lácteas isoleucina-prolina-prolina (IPP) y valina-prolina-prolina (VPP) sobre la presión arterial se han reportado en más de 20 estudios clínicos aleatorizados y controlados con placebo. Múltiples metaanálisis independientes han intentado combinar este creciente cuerpo de evidencia, con conclusiones variables según las poblaciones estudiadas y los criterios metodológicos aplicados.

Un metaanálisis que abarcó diecinueve ensayos clínicos de intervención aleatorizados encontró que dosis diarias pequeñas (2.0–10.2 mg) de tripéptidos derivados de la caseína láctea mostraron una reducción general de la presión arterial sistólica (4.0 mmHg) y diastólica (1.9 mmHg) en sujetos con hipertensión leve, en un metaanálisis de efectos aleatorios. Los resultados sugieren que dosis diarias relativamente pequeñas de lactotripéptidos en distintos productos alimenticios funcionales podrían ofrecer una opción valiosa como tratamiento no farmacológico de la prehipertensión o la hipertensión leve, como parte del asesoramiento sobre el estilo de vida.

Un metaanálisis independiente de 18 ensayos, reportado por Cicero et al. (2011), encontró que los efectos combinados de los péptidos fueron una reducción de −3.73 mmHg (IC del 95 %: −6.70, −1.76) para la presión arterial sistólica (PAS) y de −1.97 mmHg (IC del 95 %: −3.85, −0.64) para la presión arterial diastólica (PAD). El efecto fue más evidente en pacientes asiáticos (PAS = −6.93 mmHg) que en pacientes caucásicos (PAS = −1.17 mmHg), y aparentemente no estuvo relacionado con la edad, los valores basales de presión arterial, la dosis de lactotripéptidos administrada, ni la duración del tratamiento.

Un metaanálisis revisado en DARE (Xu et al., 2008), que combinó doce comparaciones de ensayos controlados aleatorizados, encontró que la IPP y la VPP redujeron significativamente la presión arterial en comparación con los controles: la presión arterial sistólica se redujo en −4.8 mmHg (IC del 95 % −6.0 a −3.7) y la diastólica en −2.2 mmHg (IC del 95 % −3.1 a −1.3). No hubo evidencia de heterogeneidad significativa ni de sesgo de publicación. El análisis por subgrupos mostró un efecto más marcado en el grupo hipertenso que en el grupo prehipertenso; la diferencia (2.4 mmHg) fue estadísticamente significativa para la presión arterial sistólica.

Un metaanálisis más reciente y exhaustivo de 24 estudios con 28 ensayos que incluyeron a 1,919 sujetos humanos (Qin et al., 2013) encontró efectos combinados más modestos: en el análisis general, se observaron reducciones pequeñas tanto en la PA sistólica (PAS) como en la PA diastólica (PAD), con efectos medios combinados de 1.66 (IC del 95 %: −2.48 y −0.84) y 0.76 mmHg (−1.31 y −0.20), respectivamente. Si bien el efecto, aunque estadísticamente significativo, es de magnitud pequeña —con efectos medios combinados de solo 1.66 y 0.76 mmHg de reducción en la PAS y la PAD, respectivamente—, el número de ensayos clínicos continúa aumentando, pero los resultados han sido inconsistentes, especialmente en los últimos años.

Evidencia en Población Japonesa

Una revisión sistemática y metaanálisis de 2015 publicado en PLOS ONE, particularmente notable por buscar en bases de datos en idioma japonés además de las internacionales, examinó el efecto de reducción de la PAS específicamente en sujetos japoneses. Se incluyeron dieciocho estudios con un total de 1,194 sujetos en el metaanálisis. Se utilizó un modelo de efectos aleatorios con el estimador de máxima verosimilitud restringida (REML) para el análisis. El análisis mostró que el consumo de IPP/VPP indujo una reducción significativa de la PAS en comparación con placebo en sujetos japoneses, con un efecto estimado de −5.63 mmHg (IC del 95 %, −6.87 a −4.39, P<0.0001) y sin evidencia de sesgo de publicación.

Se observó una heterogeneidad significativa entre las series, que podría explicarse por una influencia significativa del estado basal de presión arterial de los sujetos; el efecto de la IPP/VPP sobre la PAS fue más marcado en sujetos hipertensos (−8.35 mmHg, P<0.0001) que en sujetos no hipertensos (−3.42 mmHg, P<0.0001). Además, el efecto de la IPP/VPP sobre la PAS se mantuvo significativo al limitar el análisis a las series que probaron las dosis diarias habituales de IPP/VPP consumidas (menos de 5 mg/día), con efectos estimados de −6.01 mmHg en la población general y −3.32 mmHg en sujetos no hipertensos.

Evidencia en Población Europea

Un metaanálisis que examinó específicamente a sujetos europeos encontró que la disminución de la PAS con IPP/VPP fue de 1.28 mmHg (IC del 95 %, −2.09 a −0.48, P = 0.0017) y la disminución de la PA diastólica (PAD) fue de 0.59 mmHg (IC del 95 %, −1.18 a −0.01, P = 0.047). Los péptidos IPP y VPP son eficaces para reducir moderadamente la PAS en sujetos europeos, tal como se conoce en poblaciones asiáticas. Estos dos péptidos podrían, por lo tanto, desempeñar un papel en el control de la presión arterial, una posibilidad que merece un estudio más a fondo.

Limitaciones e Inconsistencias en la Evidencia

Los datos derivados de ensayos clínicos han llegado a conclusiones contradictorias. Algunos estudios clínicos han sugerido que estos lactotripéptidos ayudan a favorecer niveles saludables de presión arterial como parte de una dieta y un estilo de vida saludables. Sin embargo, otros ensayos clínicos no han observado ningún efecto de estos compuestos.

En los estudios sobre lactotripéptidos, la VPP y la IPP parecen ser más eficaces en la reducción de la PA de sujetos con una PA basal más alta. De hecho, en ninguno de los ensayos con sujetos normotensos se encontraron cambios estadísticamente significativos en la PA. Esto refleja el patrón observado en los primeros estudios en animales: la investigación sugiere que, en voluntarios adultos normotensos, el consumo de hasta 7.92 mg de VPP y 4.52 mg de IPP diariamente durante 2 semanas no causa signos clínicos ni efectos biológicamente relevantes sobre la presión arterial sistólica o diastólica, la frecuencia del pulso, o la patología clínica (química sérica o hematología). Sin embargo, cuando se realizó un estudio similar utilizando como sujetos a adultos con hipertensión leve y moderada, que consumieron 2.52 mg de VPP y 1.64 mg de IPP por día, se detectó una caída significativa de la presión arterial sistólica durante un intervalo de tiempo prolongado.

4.2 Rigidez Arterial y Presión Arterial Central

Más allá de la presión arterial periférica, se ha acumulado evidencia sobre los efectos de la VPP y la IPP en la rigidez arterial y la presión arterial aórtica central. Un ensayo aleatorizado, doble ciego y controlado con placebo, realizado por Nakamura et al. (2011) y publicado en Atherosclerosis, demostró que el hidrolizado de caseína que contiene Val-Pro-Pro e Ile-Pro-Pro mejora la presión arterial central y la rigidez arterial en sujetos hipertensos.

Se ha reportado que ocho semanas de ingesta de LTP mejoran la rigidez arterial, la función endotelial y la velocidad del flujo sanguíneo cerebral en adultos de mediana edad y mayores. Un ensayo clínico publicado en el Journal of Medicinal Food también examinó el efecto del hidrolizado de caseína que contiene los tripéptidos antihipertensivos VPP e IPP sobre la función endotelial vascular, independientemente de sus efectos de reducción de la presión arterial, contribuyendo a la acción inhibitoria de la enzima convertidora de angiotensina (Hypertension Research, 2007).

4.3 Función Endotelial y Salud Vascular

El hidrolizado de caseína láctea que contiene tanto VPP como IPP mejoró la función endotelial vascular de sujetos con hipertensión en etapa I, dando impulso a la dilucidación del mecanismo por el cual estos péptidos mejoran la disfunción endotelial.

Los péptidos derivados de la leche Val-Pro-Pro (VPP) e Ile-Pro-Pro (IPP) inhiben la enzima convertidora de angiotensina, dilatan los vasos sanguíneos ex vivo y estimulan la producción de óxido nítrico (NO) en las células. Tanto la disfunción endotelial como la rigidez arterial son marcadores sustitutos de la aterosclerosis y, por lo tanto, de eventos cardiovasculares (CV).

Un estudio en mujeres posmenopáusicas (Yoshizawa et al., 2010) encontró efectos beneficiosos aditivos entre la ingesta de lactotripéptidos y el ejercicio regular sobre la dilatación dependiente del endotelio en mujeres posmenopáusicas (American Journal of Hypertension, 2010).

4.4 Función Cognitiva y Flujo Sanguíneo Cerebral

Un cuerpo de investigación clínica más pequeño, pero emergente, ha examinado los efectos de la VPP sobre la función cerebrovascular. Una ingesta de LTP durante 8 semanas aumentó la oxigenación cerebral en la región de la corteza prefrontal en adultos de mediana edad y mayores, con y sin ejercicio. El deterioro relacionado con la edad en la función cognitiva y en la perfusión cerebral aumenta el riesgo de demencia. Aunque la nutrición y el ejercicio pueden ser eficaces para reducir el deterioro cognitivo, el efecto del lactotripéptido (LTP) sobre la oxigenación y la hemodinámica cerebral aún está siendo investigado.

Los investigadores han planteado la hipótesis de que un lactotripéptido con actividad inhibitoria de la ECA y capacidad para aumentar la producción de un vasodilatador podría reducir el deterioro cognitivo y la atrofia cerebral al mejorar la velocidad del flujo sanguíneo hacia el cerebro en adultos de mediana edad y mayores. Se utilizó un diseño aleatorizado, controlado con placebo y doble ciego para evaluar los beneficios para la salud de la suplementación diaria, durante 8 semanas, de un hidrolizado de caseína que contiene los péptidos VPP e IPP, en adultos sanos de mediana edad y mayores. Esta área de evidencia sigue siendo preliminar y requiere ensayos más amplios y con suficiente poder estadístico.

4.5 Fatiga

La ingesta de LTP podría ser eficaz para mitigar la fatiga, ya que un estudio observacional reportó que la función endotelial está asociada con el estado de fatiga. Un estudio reportó que una dosis única de LTP alivió temporalmente la fatiga en hombres de mediana edad y mayores. Sin embargo, los efectos de la ingesta a largo plazo de LTP sobre la fatiga aún no se han determinado formalmente. Esta área de investigación se encuentra en una etapa muy temprana y debe considerarse preliminar.

5. Sistemas Corporales y Áreas de Salud

• Sistema cardiovascular: El área principal de la investigación sobre la VPP. Los tripéptidos derivados de la caseína láctea VPP e IPP inhiben la enzima convertidora de angiotensina (ECA), y tanto la leche fermentada como los hidrolizados proteolíticos de caseína láctea que contienen estos péptidos ejercen efectos de reducción de la presión arterial en animales y humanos.
• Endotelio vascular: Se han observado mejoras en la función endotelial derivadas de la ingesta de LTP, a través de una mayor dilatación mediada por flujo (FMD) y de la velocidad de onda de pulso, en estudios clínicos.
• Sistema nervioso central / función cerebrovascular: La evidencia preliminar de ensayos en humanos sugiere efectos sobre la oxigenación cerebral y la velocidad del flujo sanguíneo, aunque esta base de evidencia es incipiente.
• Estrés oxidativo e inflamación: La evidencia in vitro indica que el tratamiento con VPP e IPP redujo el nivel de especies reactivas de oxígeno y la expresión de moléculas de adhesión inducida por vesículas extracelulares.

6. Formas de Dosificación y Dosis Reportadas en los Estudios

La VPP se administra en estudios clínicos tanto en forma de bebida láctea fermentada como en comprimidos o polvo. Se ha reportado que las dosis efectivas más baja y más alta de estos dos tripéptidos antihipertensivos administrados a humanos fueron de 3 mg/día (2 mg de VPP más 1 mg de IPP) y 52.5 mg/día (30 mg de VPP más 22.5 mg de IPP), respectivamente.

Se ha reportado que las dosis efectivas varían desde 3.07 mg/día (1.60 mg de IPP y 1.47 mg de VPP) hasta 52.5 mg/día (30 mg de IPP y 22.5 mg de VPP).

En un estudio específico, aleatorizado y controlado con placebo, sobre la fatiga en adultos de mediana edad y mayores, tres comprimidos de LTP contenían 1.4 mg de VPP y 2.0 mg de IPP. La dosis administrada se definió a partir de un estudio previo, el cual confirmó que una dosis única de 1.4 mg de VPP y 2.0 mg de IPP reducía la fatiga en hombres de mediana edad y mayores.

Diecinueve ensayos clínicos de intervención aleatorizados utilizaron dosis diarias pequeñas de 2.0–10.2 mg de tripéptidos derivados de la caseína láctea (VPP más IPP combinados). La IPP y la VPP se administraron en formas líquidas o en comprimidos durante períodos que oscilaron entre cuatro y 21 semanas, generalmente con un período de preinclusión de una a cuatro semanas.

El contexto regulatorio y de investigación japonés también ha caracterizado la ingesta aceptable. Los productos que contienen péptidos IPP y VPP en dosis efectivas (>3.0 mg/día) pueden considerarse una intervención no farmacológica segura y eficaz en pacientes con hipertensión leve.

7. Consideraciones de Seguridad

7.1 Perfil General de Seguridad

Los estudios de toxicidad en animales y los ensayos de seguridad en humanos sustentan la seguridad de los lactotripéptidos. Se organizó una serie exhaustiva de estudios toxicológicos bajo los auspicios de la evaluación regulatoria estadounidense. Se comprobó que la administración de dosis única (administración oral de 2,000 mg/kg de hidrolizado de caseína pasteurizado, 4,000 mg/kg de leche en polvo fermentada con Lactobacillus helveticus, 400 mg/kg de VPP sintetizada), de dosis repetida (16 mg/kg/día de VPP durante 8 semanas continuas, o 40 mg de IPP/kg de peso corporal/día durante 90 días), y de dosis múltiple (más de 1,000 mg/kg de peso corporal/día de hidrolizado de caseína en polvo) no mostró toxicidad sistémica ni local en ratas macho y hembra.

Se estableció formalmente un NOAEL en un estudio subcrónico de 90 días. El NOAEL equivale a una ingesta media general de 2 g de Tensguard™/kg de peso corporal/día, y corresponde a 40 mg de IPP/kg de peso corporal/día. Esto es 141 veces superior a la ingesta máxima prevista. En conclusión, el producto es seguro bajo las condiciones de uso previstas.

Ya en 1976, la Oficina de Investigación en Ciencias de la Vida de la Federación de Sociedades Americanas de Biología Experimental (FASEB) concluyó que no existen riesgos sospechosos relacionados con los hidrolizados proteicos como ingredientes alimentarios en cuanto a la salud pública. La FDA incluye a los hidrolizados proteicos dentro de la categoría "generalmente reconocido como seguro" (GRAS) bajo el 21 CFR 102.22.

En los ensayos controlados aleatorizados, la mayoría reportó eventos adversos menores tanto en los grupos de VPP/IPP como en los de placebo, ninguno de los cuales se consideró relacionado con el tratamiento.

7.2 Efecto en Individuos Normotensos

Una característica de seguridad importante es la ausencia de efectos hipotensores en personas con presión arterial normal. Los estudios han sugerido que la leche fermentada tiene un efecto normotensivo en ratas e individuos hipertensos, pero ningún efecto sobre la presión arterial en ratas e individuos normotensos. La investigación sugiere que, en voluntarios adultos normotensos, el consumo de hasta 7.92 mg de VPP y 4.52 mg de IPP diariamente durante 2 semanas no causa signos clínicos ni efectos biológicamente relevantes sobre la presión arterial sistólica o diastólica, la frecuencia del pulso, o la patología clínica (química sérica o hematología).

7.3 Consideración sobre Alérgenos

La VPP se deriva de la caseína láctea bovina. Las personas con alergia confirmada a la proteína de la leche de vaca deben actuar con precaución, ya que los productos que contienen VPP se originan a partir de una fuente alergénica importante. Esta es una consideración fáctica relacionada con el origen de la sustancia, más que un evento adverso clínico documentado de la VPP en sí; el péptido no es en sí mismo un alérgeno reconocido en las evaluaciones regulatorias formales, pero su origen a partir de caseína bovina es relevante para las personas con alergias establecidas a las proteínas lácteas.

7.4 Evaluación de la EFSA sobre Declaraciones de Propiedades Saludables y Estatus Regulatorio

El estatus regulatorio de las declaraciones de propiedades saludables de la VPP y la IPP en Europa refleja la complejidad y la inconsistencia de la base de evidencia clínica. El Panel de la EFSA sobre Productos Dietéticos, Nutrición y Alergias concluyó que no se ha establecido una relación de causa y efecto entre el consumo de IPP y VPP y el mantenimiento de una presión arterial normal, en su dictamen de 2011 conforme al Artículo 13(5) presentado bajo el Reglamento (CE) N.º 1924/2006. La interpretación de los resultados de siete de los ocho estudios que reportaron un efecto de la IPP y la VPP sobre la PAS en consulta se vio dificultada por importantes limitaciones metodológicas. Los estudios en animales no proporcionaron información adicional sobre el efecto de la IPP y la VPP sobre la PA en humanos, y no se presentó evidencia convincente sobre un mecanismo mediante el cual la IPP y la VPP pudieran ejercer sus efectos.

Tras una solicitud que fue evaluada, la EFSA concluyó que, en función de los datos presentados, no se había establecido una relación de causa y efecto entre el consumo de IPP y VPP y el efecto declarado, lo que llevó a que la Comisión Europea rechazara autorizar la declaración de propiedades saludables bajo el Reglamento de la UE N.º 1017/2013.

Este resultado regulatorio subraya que, si bien la totalidad de la evidencia —incluyendo numerosos ECA y múltiples metaanálisis— muestra reducciones de la presión arterial consistentes, aunque modestas, en individuos hipertensos (particularmente en poblaciones asiáticas), los organismos regulatorios europeos exigieron un estándar de prueba más alto y metodológicamente más riguroso del que estaba disponible en el momento de la revisión, particularmente en lo que respecta a ensayos con suficiente poder estadístico en poblaciones europeas.

En Japón, por el contrario, la VPP y la IPP han recibido aprobación y se han incorporado a los Alimentos para Usos Específicos de Salud (FOSHU, por sus siglas en inglés). La aprobación regulatoria en Japón y el consumo japonés de alimentos con niveles aumentados de VPP más IPP están formalmente documentados en resúmenes regulatorios y toxicológicos publicados.

8. Resumen de la Solidez de la Evidencia

La evidencia científica general sobre los efectos de la VPP en la presión arterial en individuos hipertensos es moderada, respaldada por un gran número de ensayos controlados aleatorizados y múltiples metaanálisis independientes, con efectos consistentes pero modestos (aproximadamente de −2 a −6 mmHg de reducción de la PAS, según la población). La evidencia es más sólida en poblaciones hipertensas japonesas/asiáticas; los efectos en individuos normotensos caucásicos/europeos son débiles o nulos, según ensayos con suficiente poder estadístico. Los lactotripéptidos VPP e IPP, consumidos como alimentos funcionales, podrían reducir significativamente la PAS, particularmente en sujetos asiáticos. La relevancia de estos hallazgos en otras etnias o en asociación con distintos patrones dietéticos debería investigarse más a fondo.

La evidencia sobre la función endotelial vascular y la rigidez arterial es preliminar pero mecanísticamente coherente, respaldada por estudios in vitro, en animales y un pequeño número de ensayos en humanos. La evidencia sobre la función cognitiva, los efectos cerebrovasculares y la fatiga se encuentra en una etapa muy temprana, limitada a pocos ensayos individuales pequeños, y no puede considerarse establecida. Los dictámenes científicos de la EFSA de 2011 y 2012 concluyeron que la evidencia era insuficiente para una declaración de propiedades saludables conforme a la legislación europea, a pesar de los datos disponibles.

Referencias

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• Study of the mechanism of antihypertensive peptides VPP and IPP in spontaneously hypertensive rats by DNA microarray analysis – PubMed (2009)
• Studies of the toxicological potential of tripeptides (L-valyl-L-prolyl-L-proline and L-isoleucyl-L-prolyl-L-proline): II. Introduction – PubMed (2006)
• Blood pressure lowering effect of lactotripeptides assumed as functional foods: a meta-analysis of current available clinical trials – PubMed (2010)
• Do the lactotripeptides isoleucine-proline-proline and valine-proline-proline reduce systolic blood pressure in European subjects? A meta-analysis of randomized controlled trials – PubMed (2013)
• Effect of milk tripeptides on blood pressure: a meta-analysis of randomized controlled trials – DARE/NCBI Bookshelf (2008)
• Lactotripeptides intake and blood pressure management: a meta-analysis of randomised controlled clinical trials – DARE/NCBI Bookshelf (2013)
• Influence of the Lactotripeptides IPP and VPP on Systolic Blood Pressure in Japanese Subjects: A Systematic Review and Meta-Analysis – PLOS ONE (2015)
• Antihypertensive effects of bioactive tripeptides—a random effects meta-analysis – Annals of Medicine (2012)
• Lactotripeptides intake and blood pressure management: A meta-analysis of randomised controlled clinical trials – Nutrition, Metabolism and Cardiovascular Diseases (2013)
• Structural insights into the inhibitory mechanism of angiotensin-I-converting enzyme by the lactotripeptides IPP and VPP – FEBS Letters/PMC (2024)
• IPP-rich milk protein hydrolysate lowers blood pressure in subjects with stage 1 hypertension, a randomized controlled trial – Nutrition Journal/PMC (2010)
• The milk-derived peptides Val-Pro-Pro and Ile-Pro-Pro attenuate arterial dysfunction in L-NAME-treated rats – Hypertension Research (2014)
• The Protective Effects of Tripeptides VPP and IPP against Small Extracellular Vesicles from Angiotensin II-Induced Vascular Smooth Muscle Cells Mediating Endothelial Dysfunction – PubMed (2020)
• EFSA Scientific Opinion on the substantiation of a health claim related to IPP and VPP and maintenance of normal blood pressure (Article 13(5)) – EFSA Journal (2011)
• EFSA Scientific Opinion on the substantiation of health claims related to IPP and VPP (ID 661, 1831, 1832, 2891, further assessment) – EFSA Journal (2012)
• Commission Regulation (EU) No 1017/2013 refusing to authorise certain health claims including VPP/IPP – UK Legislation
• Safety evaluation of an IPP tripeptide-containing milk protein hydrolysate – Food and Chemical Toxicology (2008)
• Lactotripeptides – ScienceDirect Topics Overview
• Bioactive peptides derived from fermented foods: Preparation and biological activities – Journal of Functional Foods (2023)
• Invited review: Lactobacillus helveticus — A thermophilic dairy starter related to gut bacteria – Journal of Dairy Science (2010)
• Combined effects of lactotripeptide and aerobic exercise on cognitive function and cerebral oxygenation in middle-aged and older adults – PubMed (2019)
• Effects of lactotripeptide ingestion and physical activity intervention on the fatigue status of middle-aged and older adults – PMC (2023)
• Lactotripeptide ingestion increases cerebral blood flow velocity in middle-aged and older adults – Nutrition (2018)
• Identification of Antihypertensive Tripeptides in the Culture Medium of Lactobacillus helveticus D75 and D76 Strains – ResearchGate/Springer (2020)
• Lactotripeptide Research Overview – Asahi Group Holdings